蛋白純化儀是一種用于分離和純化蛋白質等生物分子的儀器,主要基于層析技術原理,利用不同蛋白質在固定相和流動相之間分配系數的差異,通過選擇合適的純化填料,如凝膠過濾層析填料、離子交換層析填料、疏水層析填料和親和層析填料等,在液體流動動力的作用下,使蛋白質混合物在層析柱中進行分離。
蛋白純化儀的操作要點與維護規范:
1、操作前準備:
環境檢查:確保儀器放置平穩,遠離振動源和高溫環境。
緩沖液處理:所有緩沖液需用0.45 μm濾膜過濾,并超聲脫氣10分鐘,避免氣泡干擾泵運行。
樣品預處理:離心或過濾樣品,去除顆粒物防止堵塞管路。
2、運行中監控:
壓力控制:設置報警閾值,避免柱床塌陷。
流速調節:啟動時從低流速逐步升高至目標值。
檢測信號:實時觀察UV基線穩定性,排查氣泡或燈源老化問題;電導率波動可能提示緩沖液混合不均。
3、使用后維護:
管路清洗:依次用純水(15分鐘)→20%乙醇(10分鐘)沖洗,防止生物殘留。
層析柱保存:按填料要求保存。
傳感器維護:每周校正pH電極,清潔UV檢測器流通池,必要時更換光源。